1  10-羟基-α-癸烯的测定

1.1  试剂

1.1.1  本试验所用水为重蒸馏水

1.1.2  甲醇：色谱纯

1.1.3  无水乙醇：优级纯

1.1.4  盐酸：优级纯

1.1.5  内标物：对羟基苯甲酸甲酯，含量99.0%以上

1.1.6  10-HDA标准品：99.0%以上。使用前应放有硫酸的减压干燥器内干燥24h。

1.1.7  10-HDA标准溶液：称取干燥过的10-HDA标准品25mg于小烧杯中,精密称定。加无水乙醇溶解并移入25mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液1mL含10-HAD约1mg。

1.1.8  内标溶液：取已干燥过的对羟基苯甲酸甲酯约650mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入1000mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液1mL含内标物约0.65mg。

1.1.9  盐酸溶液c=0.03moL/L：量取0.1moL/L的盐酸100mL加200mL重蒸馏水中。

1.2  仪器

1.2.1  高效液相色谱仪：配置紫外检测器，记录仪或微处理机

1.2.2  超声波清洗器

1.2.3  旋涡混匀器

1.2.4  分析天平：感量0.0001g

1.3  样品溶液的制备：取样品20粒，剪破，挤出内容物于小烧杯中，搅匀。精确称取内容物0.3～0.5g（精确到0.0001g）于小烧杯中，加2mL水、1mL 0.03mol/L的盐酸溶液，用玻棒充分搅匀或采用旋涡混匀器使试样溶解，用少量无水乙醇，边加边轻轻摇动，再转移至预先精密加入10mL内标溶液的50mL容量瓶中。将烧杯用无水乙醇洗3～4次，洗液倒入容量瓶中，用无水乙醇加至约45mL，超声20～30min后取下冷却至室温，用无水乙醇定容，摇匀，静置或离心，上清液用0.45μm的微孔滤膜过滤于小试剂瓶中，待测定。

1.4  色谱条件

1.4.1  色谱柱：4.6mm×250mm不锈钢柱，填充无定形硅胶C18键合相，10μm或5μm。

1.4.2  流动相：甲醇-0.03moL/L盐酸溶液-水=55:10:35

1.4.3  流动相流速：1mL/min

1.4.4  柱温度：35℃

1.4.5  检测波长：210nm

1.5  校正因子测定：精密吸取10-HDA标准溶液0.5、1、2、3、4、5mL至10mL容量瓶中。精密加入内标溶液2mL，用无水乙稀释至刻度，摇匀。用0.45μm微孔滤膜过滤于小试剂瓶中。分别吸取此溶液5μL，注入色谱仪，用峰面积比值计算，应呈线性，求出校正因子F。

1.6  样品测定：吸取试样溶液5μL，注入色谱仪，按“内标法”定量。

1.7  结果计算

                    A_i     m_s

X = F×——×——×100

                    A_s     m_i

式中：

X—样品中10-羟基-α-癸烯酸含量，%；

F—校正因子；

A_i—样品中被测组分峰面积；

A_s—样品中内标物峰面积；

m_s—内标物质量，g；

m_i—样品质量，g。